Comunica experienta
MonitorulJuridic.ro

Trimite prin Yahoo Messenger pagina: ORDIN nr. 24 din 10 iunie 2004 pentru aprobarea Normei veterinare ce stabileste o metoda nationala de analiza pentru determinarea lasalocidului de sodiu din furaje

Cautare document

Termen: Tipul actului: Anul publicarii actului:

Cautare document

Termen: Tipul actului: Anul publicarii actului:

Copierea de continut din prezentul site este supusa regulilor precizate in Termeni si conditii! Click aici.
Prin utilizarea siteului sunteti de acord, in mod implicit cu Termenii si conditiile! Orice abatere de la acestea constituie incalcarea dreptului nostru de autor si va angajeaza raspunderea!

ORDIN nr. 24 din 10 iunie 2004 pentru aprobarea Normei veterinare ce stabileste o metoda nationala de analiza pentru determinarea lasalocidului de sodiu din furaje

EMITENT: AGENTIA VETERINARA SI PENTRU SIGURANTA ALIMENTELOR
PUBLICAT: MONITORUL OFICIAL nr. 1.020 din 4 noiembrie 2004

Comenteaza legea

În temeiul prevederilor <>art. 10 lit. b) din Ordonanta Guvernului nr. 42/2004 privind organizarea activitãţii veterinare,
în baza <>Hotãrârii Guvernului nr. 308/2004 privind organizarea şi funcţionarea Agenţiei Veterinare şi pentru Siguranta Alimentelor şi a unitãţilor din subordinea acesteia,
vazand Referatul de aprobare nr. 153.190 din 26 mai 2004 al Direcţiei generale veterinare,

preşedintele Agenţiei Veterinare şi pentru Siguranta Alimentelor emite urmãtorul ordin:

ART. 1
Se aproba Norma veterinara ce stabileşte o metoda nationala de analiza pentru determinarea lasalocidului de sodiu din furaje, prevãzutã în anexa care face parte integrantã din prezentul ordin.
ART. 2
Institutele centrale de profil, direcţiile veterinare şi pentru siguranta alimentelor judeţene şi a municipiului Bucureşti vor duce la îndeplinire prevederile prezentului ordin.
ART. 3
Agenţia Veterinara şi pentru Siguranta Alimentelor va controla modul de îndeplinire a prezentului ordin.
ART. 4
Prezentul ordin se va publica în Monitorul Oficial al României, Partea I.

Preşedintele Agenţiei Veterinare şi pentru Siguranta Alimentelor,
Liviu Harbuz

Bucureşti, 10 iunie 2004.
Nr. 24.

ANEXA

NORMA VETERINARA
ce stabileşte o metoda nationala de analiza pentru determinarea lasalocidului de sodiu din furaje

ART. 1
Analizele efectuate în vederea controalelor oficiale ale conţinutului în lasalocid al furajelor şi premixurilor trebuie sa fie realizate utilizând metoda stabilitã de anexa la prezenta norma sanitarã veterinara.
ART. 2
(1) Autoritatea veterinara centrala a României poate adopta, acte normative sau prevederi administrative suplimentare prezentei norme veterinare, pentru a dispune implementarea şi respectarea prevederilor acesteia.
(2) Autoritatea veterinara centrala a României va lua mãsurile necesare şi va sanctiona, potrivit legii orice încãlcare a prevederilor prezentei norme veterinare.
(3) Atunci când autoritatea veterinara centrala a României adopta cele menţionate la alineatele precedente, trebuie sa se facã o referire expresã la prezenta norma veterinara.

ANEXA
-----
la norma veterinara
-------------------

DETERMINAREA LASALOCIDULUI DE SODIU (E 763)

Sare sodica a unui polieter al acidului monocarboxilic produsã de Streptomyces lasaliensis
1. Scop şi domeniu de aplicare
Metoda permite determinarea lasalocidului de sodiu din furaje şi premixuri. Limita de detectie este de 5 mg/kg iar limita de determinare este de 30 mg/kg.
2. Principiul
Lasalocidul de sodiu este extras din proba cu metanol acidifiat şi determinat prin cromatografie lichidã de inalta performanta în faza inversa (HPLC), utilizând un detector spectrofluorimetric.
3. Reactivi
3.1. Fosfat dihidrogenat de potasiu [KH(2)PO(4)]
3.2. Acid ortofosforic, w = 85%
3.3. Soluţie de acid ortofosforic, sigma = 20%
Se dilueaza 23,5 ml de acid ortofosforic (3.2) în apa şi se aduce la 100 ml.
3.4. 6-metil-2-heptilamina (1,5-dimetilhexilamina), w = 99%
3.5. Metanol, de grad HPLC
3.6. Acid clorhidric, p20 1,19 g/ml
3.7. Soluţie tampon de fosfat, c = 0,01 mol/l
Se dizolva 1,36 g de KH(2)PO(4) (3.1) în 500 ml de apa (3.11), se adauga 3,5 ml de acid orthofosforic (3.2) şi 10,0 ml de 6-metil-2-heptilamina (3.4). Se ajusteaza pH-ul la 4,0 cu soluţie de acid ortofosforic (3.3), se dilueaza cu apa şi se aduce la 1000 ml (3.11).
3.8. Metanol acidifiat
Se transfera 5,0 ml de acid clorhidric (3.6) într-un balon gradat de 1000 ml, se aduce la semn cu metanol (3.5) şi se amesteca. Aceasta soluţie trebuie sa fie proaspãt preparata înainte de utilizare.
3.9. Faza mobila pentru HPLC, soluţie tampon de fosfat şi metanol 5 + 95 (V + V)
Se amesteca 5 ml de soluţie tampon de fosfat (3.7) cu 95 ml de metanol (3.5).
3.10. Substanta etalon lasalocid de sodiu cu puritate garantatã, C(34)H(53)O(8)Na (sare sodica de polieter a acidului monocarboxilic, produs de Streptomyces lasaliensis), E763.
3.10.1. Soluţie mama din etalon de lasalocid de sodiu, 500 æg/ml
Se cantaresc cu o precizie de 0,1 mg, 50 mg de lasalocid de sodiu (3.10) într-un balon gradat de 100 ml, se dizolva în metanol acidifiat (3.8), se aduce la semn cu acelaşi solvent şi se amesteca. Aceasta soluţie trebuie sa fie proaspãt preparata înainte de utilizare.
3.10.2. Soluţie etalon intermediara de lasalocid de sodiu, 50 æg/ml
Se pipeteaza 10,0 ml de soluţie mama din etalon (3.10.1) într-un balon gradat de 100 ml, se aduce la semn cu metanol acidifiat (3.8) şi se amesteca. Soluţia trebuie sa fie proaspãt preparata înainte de utilizare.
3.10.3. Soluţii de etalonare
Se transfera 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 şi 10,0 ml din soluţia etalon intermediara (3.10.2) într-o serie de baloane gradate de 50 ml. Se aduce la semn cu metanol acidifiat (3.8) şi se amesteca. Aceste soluţii corespund respectiv la 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 şi 10,0 æg de lasalocid de sodiu pe ml. Aceste soluţii trebuie sa fie proaspãt preparate înainte de utilizare.
3.11. Apa, de calitate HPLC
4. Aparatura
4.1. Baie cu ultrasunete (sau baie de apa cu agitator) cu reglaj de temperatura
4.2. Filtre cu membrana de 0,45 æm
4.3. Echipament HPLC cu sistem de injecţie, corespunzãtor pentru injectarea de volume de 20 de æl
4.3.1. Coloana pentru cromatografie lichidã de 125 mm x 4 mm, în faza inversa C18, umplere de 5 æm sau echivalenta
4.3.2. Spectrofluorimetru cu ajustarea lungimilor de unda variabile a lungimilor de unda de excitatie şi emisie
5. Procedura
5.1. Generalitati
5.1.1. Furaj martor
Pentru efectuarea testului de recuperare (5.1.2), trebuie analizat un furaj martor pentru a se verifica faptul ca nu este prezent lasalocid de sodiu sau substanţe interferente. Furajul martor trebuie sa fie de tip similar cu cel al probei şi nu trebuie sa fie detectate lasalocidul de sodiu sau substantele intereferente.
5.1.2. Test de recuperare
Trebuie efectuat un test de recuperare prin analizarea furajului martor ce a fost imbogatit prin adãugarea unei cantitãţi de lasalocid de sodiu, similarã celei prezente în proba. Pentru a se fortifica la un nivel de 100 mg/kg, se transfera 10,0 ml din soluţia mama din etalon (3.10.1) într-un balon conic de 250 ml şi se evapora soluţia pana la aproximativ 0,5 ml. Se adauga 50 g de furaj martor, se amesteca cu grija şi se lasa timp de 10 minute, amestecand din nou de mai multe ori înainte de a se continua cu faza de extracţie (5.2).
Alternativ, dacã un furaj martor de tip similar cu cel al probei nu este disponibil (vezi 5.1.1), poate fi efectuat un test de recuperare prin intermediul metodei de adaugare de etalon. În acest caz, proba ce trebuie analizata este imbogatita cu o cantitate de lasalocid de sodiu, similarã celei deja prezente în proba. Aceasta proba este analizata împreunã cu proba neimbogatita iar recuperarea calculatã prin diferenţa.
5.2. Extractia
5.2.1. Furaje
Se cantaresc cu precizie de 0,01 g, între 5 g şi 10 g de proba într-un balon conic de 250 ml cu dop. Se adauga prin pipetare 100,0 ml de metanol acidifiat (3.8). Se astupa lejer şi se agita pentru a se dispersa. Se plaseaza balonul într-o baie cu ultrasunete (4.1) la aproximativ 40°C timp de 20 de minute, apoi se scoate şi se raceste la temperatura camerei. Se lasa sa stea aproximativ 1 ora pana ce s-au decantat materiile în suspensie, apoi se filtreaza o parte alicota printr-un filtru cu membrana de 0,45 æm (4.2) într-un vas corespunzãtor. Se continua cu determinarea HPLC (5.3).
5.2.2. Premixuri
Se cantaresc cu precizie de 0,001 g aproximativ 2 g de premix nemaruntit într-un balon gradat de 250 ml. Se adauga 100,0 ml de metanol acidifiat (3.8) şi se agita pentru a se dispersa. Se plaseaza balonul şi conţinutul într-o baie cu ultrasunete (4.1), la aproximativ 40°C, timp de 20 de minute, apoi se scoate şi se raceste la temperatura camerei. Se dilueaza pana la semn cu metanol acidifiat (3.8) şi se amesteca cu grija. Se lasa sa stea timp de o ora pana se decanteaza materiile în suspensie, apoi se filtreaza o parte alicota printr-un filtru cu membrana de 0,45 æm (4.2). Se dilueaza un volum corespunzãtor de filtrat clar cu metanol acidifiat (3.8), pentru a se obţine o soluţie de testare finala ce conţine aproximativ 4 æg/ml de lasalocid de sodiu. Se continua cu determinarea HPLC (5.3).
5.3. Determinarea HPLC
5.3.1. Parametri
Urmãtoarele condiţii sunt oferite spre orientare; pot fi utilizate alte condiţii cu condiţia ca acestea sa dea rezultate echivalente:
Coloana cromatografica lichidã (4.3.1): 125 mm x 4 mm, în faza inversa C18, umplere de 5 æm sau echivalenta
Faza mobila (3.9): Amestec de soluţie tampon de fosfat (3.7) şi metanol (3.5), 5 + 95 (V + V)

Debit: 1,2 ml/min
Lungimea undei de detectie:
- Excitatie: 310 nm
- Emisie: 419 nm
Volum de injecţie: 20 æl

Se verifica stabilitatea sistemului cromatografic, injectandu-se de mai multe ori soluţia de etalonare (3.10.3) ce conţine 4,0 æg/ml, pana când sunt obţinute înãlţimi (sau arii) ale picului şi timpi de retenţie constanti.
5.3.2. Curba de etalonare
Se injecteaza fiecare soluţie de etalonare (3.10.3) de mai multe ori şi se determina inaltimile (ariile) medii ale picului, pentru fiecare concentraţie. Se stabileşte o curba de etalonare utilizând inaltimile (ariile) medii ale picului ca ordonate şi concentratiile corespondente în æg/ml ca abscise.
5.3.3. Soluţia probei
Se injecteaza extractul probei (5.2.1 sau 5.2.2) de mai multe ori, utilizând acelaşi volum ca cel reţinut pentru soluţia de etalonare şi se determina inaltimile (ariile) medii ale picului lasalocidului de sodiu.
6. Calcularea rezultatelor
Plecand de la înãlţimea (aria) medie a picului produsã prin injectarea soluţiei probei (5.3.3), se determina concentratia de lasalocid de sodiu (æg/ml) prin raportare la curba de etalonare.
6.1. Furaje
Conţinutul în lasalocid de sodiu, w (mg/kg) din proba este dat de urmãtoarea formula:


       beta ● V(1)

unde:
beta = conţinutul în lasalocid de sodiu al soluţiei probei (5.2.1) în æg/ml;
V(1) = volumul extractului probei, în conformitate cu 5.2.1 în ml (de ex. 100);
m = masa partii de test, în g.
6.2. Premixuri
Conţinutul în lasalocid de sodiu, w (mg/kg) din proba este dat de urmãtoarea formula:


         beta ● V(2) ● f

unde:
beta = concentratia de lasalocid de sodiu a soluţiei probei (5.2.2) în æ/ml;
V(2) = volumul extractului probei, în conformitate cu 5.2.2 în ml (de ex. 250);
f = factor de dilutie, în conformitate cu 5.2.2;
m = masa partii de test în g.
7. Validarea rezultatelor
7.1. Identitate
Metodele bazate pe spectrofluorimetrie sunt mai puţin supuse interferentei decât cele la care este utilizata detectia UV. Identitatea substanţei de analizat poate fi confirmatã prin co-cromatografie.
7.1.1. Co-cromatografie
Un extract al probei (5.2.1 sau 5.2.2) este imbogatit prin adãugarea unei cantitãţi corespunzãtoare din soluţia de etalonare (3.10.3). Cantitatea de lasalocid de sodiu adãugatã trebuie sa fie similarã cu cantitatea de lasalocid de sodiu constatatã în extractul probei. Numai înãlţimea picului lasalocidului de sodiu trebuie sa fie mai mare într-o mãsura ce este corelata cu cantitatea de lasalocid de sodiu adãugatã şi dilutia extractului. Largimea picului la jumãtatea inaltimii trebuie sa se situeze la ±10% de largimea iniţialã a picului produsã de extractul probei neimbogatite.
7.2. Repetabilitate
Diferenţa dintre rezultatele a doua determinãri paralele efectuate pe aceeaşi proba nu trebuie sa depãşeascã:
- 15% cu referire la valoarea maxima pentru conţinutul în lasalocid de sodiu de la 30 mg/kg la 100 mg/kg,
- 15 mg/kg pentru conţinutul în lasalocid de sodiu de la 100 mg/kg la 200 mg/kg,
- 7,5% cu referire la valoarea maxima pentru un conţinut în lasalocid de sodiu mai mare de 200 mg/kg.
7.3. Recuperare
Pentru proba de furaj (martor) imbogatita, recuperarea trebuie sa fie de cel puţin 80%. Pentru probele de premix imbogatite, recuperarea trebuie sa fie de cel puţin 90%.
8. Rezultatele unui studiu de colaborare
A fost organizat un studiu de colaborare în care 2 probe de premixuri (probele 1 şi 2) şi 5 probe de furaje (probele 3-7) au fost analizate de 12 laboratoare. Pentru fiecare proba au fost efectuate analize duble. Rezultatele sunt date în urmãtorul tabel:


┌──────────────────────┬───────┬───────┬───────┬───────┬───────┬───────┬───────┐
│                      │Proba 1│Proba 2│Proba 3│Proba 4│Proba 5│Proba 6│Proba 7│
│                      │Premix │Premix │Pelete │Granule│ Furaj │Furaj A│Furaj B│
│                      │  pui  │ curci │ curci │  pui  │ curci │pãsãri │pãsãri │
├──────────────────────┼───────┼───────┼───────┼───────┼───────┼───────┼───────┤
│L                     │  12   │  12   │  12   │  12   │  12   │  12   │  12   │
│N                     │  23   │  23   │  23   │  23   │  23   │  23   │  23   │
│Medie (mg/kg)         │ 5.050 │16.200 │ 76,5  │ 78,4  │ 92,9  │ 48,3  │ 32,6  │
│S(r) (mg/kg)          │  107  │  408  │ 1,71  │ 2,23  │ 2,27  │ 1,93  │ 1,75  │
│CV(r) (%)             │ 2,12  │ 2,52  │ 2,24  │ 2,84  │ 2,44  │ 4,00  │ 5,37  │
│S(R) (mg/kg)          │  286  │  883  │ 3,85  │ 7,32  │ 5,29  │ 3,47  │ 3,49  │
│CV(R) (%)             │ 5,66  │ 5,45  │ 5,03  │ 9,34  │ 5,69  │ 7,18  │ 10,70 │
│Conţinut nominal      │5000*) │16000*)│ 80*)  │ 105*) │ 120*) │ 50+)  │ 35+)  │
│(mg/kg)               │       │       │       │       │       │       │       │
└──────────────────────┴───────┴───────┴───────┴───────┴───────┴───────┴───────┘

    L: numãr laboratoare
    n: numãr rezultate unice
    Sr: deviatie standard a repetabilitatii
    SR: deviatie standard a reproductibilitatii
    CVr: coeficient de variatie a repetabilitatii, %
    CVR: coeficient de variatie a reproductibilitatii, %

*) conţinut declarat de fabricant.
+) furaj preparat în laborator.

-------------

Newsletter GRATUIT

Aboneaza-te si primesti zilnic Monitorul Oficial pe email

Tags: Monitorul Oficial, Acte Monitorul Oficial, Ordin, Alte Institutii, ORDIN nr. 24 din 10 iunie 2004

Comentarii

Fii primul care comenteaza.

MonitorulJuridic.ro este un proiect:

Atentie, Juristi!

5 modele Contracte Civile si Acte Comerciale - conforme cu Noul Cod civil si GDPR

Legea GDPR a modificat Contractele, Cererile sau Notificarile obligatorii

Va oferim Modele de Documente conform GDPR + Clauze speciale

Descarcati GRATUIT Raportul Special "5 modele Contracte Civile si Acte Comerciale - conforme cu Noul Cod civil si GDPR"